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課程名稱 |
應用微生物學實驗
APPLIED MICROBIOLOGY LAB |
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開課學期 |
99-1 |
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授課對象 |
生命科學院 生化科技學系 |
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授課教師 |
李昆達 |
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課號 |
BST3009 |
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課程識別碼 |
B02 30090 |
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班次 |
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學分 |
2 |
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全/半年 |
半年 |
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必/選修 |
必修 |
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上課時間 |
星期四5,6,7,8(12:20~16:20) |
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上課地點 |
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備註 |
講解於106教室(第5堂)，實驗於農化二111(6~8堂)。
總人數上限：20人 |
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Ceiba 課程網頁 |
http://ceiba.ntu.edu.tw/991appmicrolab |
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課程簡介影片 |
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核心能力關聯 |
核心能力與課程規劃關聯圖 |
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課程大綱
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為確保您我的權利,請尊重智慧財產權及不得非法影印
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課程概述 |
應用微生物學與發酵技術在現代生物工業的生產程序中，已成功用來生產具有高經濟價值之生物醫學重組蛋白質與次級代謝產物。本課程是為了配合應用微生物學所開設之實驗課程，可以讓學生瞭解並實際操作在微生物工業中，從菌種篩選、發酵培養、到蛋白質及小分子代謝物生產純化與分析技術等生產程序，是一門結合生物化學實驗與普通微生物學實驗之進階與綜合訓練課程。其內容包含：
1. 納豆菌之液態發酵生產。
2. 紅麴菌之固態醱酵生產。
3. 酵母菌之酒精醱酵生產。
4. 嗜甲醇酵母菌 Pichia pastoris之異源蛋白質發酵生產。 |
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課程目標 |
挑選工業微生物之代表性菌種與產物，例如具保健功能微生物之發酵、酒精之生產製造，以及工業上異源蛋白質之發酵槽生產與純化。經由實際操作，讓學生學習應用微生物發酵產程之原理與技術並讓學生學習產物分析與純化方式，期望讓學生將其他科學課程之知識，與生技產業相連結。 |
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課程要求 |
修過生化實驗、微生物學實驗、分析化學實驗為佳。
上課注意事項：
1. 實驗講解與結果討論於每週上課時間在農化新館 106 教室；實驗操作依操作時間於農化新館 110 教室進行。
2. 實驗課進行間，請同學著實驗衣、護目鏡；進入實驗室後不得飲食。
3. 在實驗課進行前，請同學寫預報並予小助教簽名確認了解實驗之原理及步驟；實驗單元結束後，請同學將實驗結果整理成投影片檔案，以利分享及討論。討論結束後，請同學於兩週內上傳實驗報告；報告應包括摘要、簡介、材料與方法、結果、討論、參考資料等部分。報告嚴禁抄襲。 |
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預期每週課後學習時數 |
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Office Hours |
每週三 09:00~12:00
每週五 09:00~12:00 |
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指定閱讀 |
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參考書目 |
1*劉俊民、李昆達: 編輯講義、資料
2.Michael J. Pelczar, E. C. S. Chan: Laboratory exercises in microbiology,4th ed
New York : McGraw-Hill( 1977)
3.蘇遠志、黃世佑﹕微生物化學工程學,華香園出版社(1994)
4.續光清﹕食品工業，徐氏基金會(1986)
5.潘子明:發現紅麴新價值(2009.10)
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評量方式
(僅供參考) |
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No. |
項目 |
百分比 |
說明 |
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1. |
學習態度 |
50% |
出席狀況、實驗操作及參與討論。 |
2. |
實驗報告 |
50% |
預報及結果報告。 |
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週次 |
日期 |
單元主題 |
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第1週 |
9/16 |
課程簡介；納豆菌醱酵：培養基製備 |
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第2週 |
9/23 |
納豆菌醱酵：納豆菌醱酵培養 |
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第3週 |
9/30 |
納豆菌醱酵：納豆激酶活性測定；Ultrafiltration（示範實驗） |
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第4週 |
10/07 |
納豆菌醱酵：結果討論；紅麴菌之固態醱酵：培養基製備 |
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第5週 |
10/14 |
紅麴菌之固態醱酵：紅麴菌醱酵培養 |
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第6週 |
10/21 |
紅麴菌之固態醱酵：紅麴之生長測定及其有效成分分析 |
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第7週 |
10/28 |
紅麴菌之固態醱酵：結果討論；酵母菌之酒精醱酵：培養基製備、酵母菌聚積培養 |
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第8週 |
11/04 |
酵母菌之酒精醱酵：酵母菌分離及酒精醱酵 |
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第9週 |
11/11 |
酵母菌之酒精醱酵：酒精測定與殘糖測定 |
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第10週 |
11/18 |
酵母菌之酒精醱酵：結果討論；嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：培養基製備 |
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第11週 |
11/25 |
嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：電轉形（示範實驗）；篩選生產菌株 (zeocin selection) |
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第12週 |
12/02 |
嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：三角搖瓶培養 |
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第13週 |
12/09 |
嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：酵素活性分析；異源蛋白確認 (Western)；DNA 抽取 |
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第14週 |
12/16 |
嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：real-time PCR |
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第15週 |
12/23 |
嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：小量培養成果討論；醱酵槽組裝及滅菌；醱酵槽培養開始 |
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第16週 |
12/30 |
嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：醱酵槽培養之蛋白確認與純化；酵素活性分析 |
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第17週 |
1/06 |
嗜甲醇酵母菌生產異源蛋白：結果討論；學期回顧與心得分享 |